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技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20223-31
    唾液彎曲桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒?檢測(cè)方法

    唾液彎曲桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒檢測(cè)方法包括以下步驟:(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。其...

  • 20223-29
    牛巨細(xì)胞病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作

    牛巨細(xì)胞病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作:1.模板制備(樣本制備區(qū))建議使用配套水生動(dòng)物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過(guò)程詳見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒中進(jìn)行)請(qǐng)于-20℃條件下保存,有效期12個(gè)月取出所需測(cè)試數(shù)的已含有反應(yīng)液A-TSV-I的PCR管,將試劑*解凍,離心30秒,在管蓋上標(biāo)記管名(陰性對(duì)照管NG、樣品XX、陽(yáng)性對(duì)照管PG)。打開(kāi)管蓋向各管管底分別加入0.8μLB-I及0.2μLR-I,蓋上陰性對(duì)照管管蓋,其他各管分別...

  • 20223-24
    核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過(guò)程

    核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過(guò)程:1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家...

  • 20223-22
    保加利亞乳桿菌操作流程

    保加利亞乳桿菌操作流程:菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)1)所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號(hào)、菌種名常用縮寫(xiě)如下:cal:白念珠菌cgl:光滑念珠菌cpa:近平滑念珠菌ctr:熱帶念珠菌ckr:克柔念珠菌cne:新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名。2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)。簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)...

  • 20223-17
    狼源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒?檢測(cè)方法步驟

    狼源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒檢測(cè)方法步驟:(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。其中步驟(1...

  • 20223-15
    人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟

    人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干...

  • 20223-9
    熒光定量PCR試劑盒在哪些領(lǐng)域可開(kāi)展實(shí)踐?

    熒光定量PCR技術(shù)及熒光定量PCR試劑盒的出現(xiàn),大大簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程,而且真正實(shí)現(xiàn)了絕對(duì)定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn),使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率,反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合,熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識(shí)到,F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國(guó)各個(gè)研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見(jiàn),這就需要我們更充分地推廣該技術(shù),以推動(dòng)研究工作的快速發(fā)展。熒光定量PCR技術(shù)是通過(guò)熒...

  • 20223-3
    大鼠琥珀酸;丁二酸ELISA檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求

    大鼠琥珀酸;丁二酸ELISA檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中...

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